Introducción
El Agilent BioTek BioCell es un recipiente exclusivo de cuarzo que permite la determinación de absorbancia de sustancias con una longitud de trayectoria vertical fija de 1 cm en un lector de microplacas. El BioCell se puede utilizar para medir la absorbancia de 1 cm en cualquier lector de microplacas de Agilent BioTek. También es útil para la determinación del valor "k" (la absorbancia medida del solvente experimental en una longitud de trayectoria de 1 cm, utilizada en la corrección de longitud de trayectoria) necesaria para corregir con mayor precisión la absorbancia de soluciones acuosas en microplacas a valores de 1 cm con espectrofotómetros de microplacas de Agilent BioTek. El BioCell tiene un puerto de llenado ubicado cerca de la región de transmisión de la celda, lo que permite un llenado completo sin interferir con la trayectoria de la luz. La dimensión vertical interna es de 10,00 mm, o 1,0 cm (Figura 1).
Figura 1. Diagrama seccional del BioCell de Agilent BioTek.
Llenando el BioCell
Para obtener lecturas precisas con el BioCell, es importante que no haya burbujas de aire atrapadas en la región de transmisión. Para evitar burbujas de aire, se recomienda inclinar el BioCell de modo que el orificio de llenado quede en la parte superior, con la región de transmisión del BioCell inclinada hacia abajo (Figura 2). Llena cuidadosamente el BioCell usando un pipeteador con puntas de 200 µL o una pipeta Pasteur estrecha, para que la parte de la caja de la celda quede completamente llena. Ten en cuenta que la parte del cuello no necesita estar llena hasta arriba. Coloca el BioCell en el adaptador de modo que la región de transmisión de la celda quede ubicada sobre el orificio en la parte inferior del adaptador. El pico de llenado debe estar ubicado sobre la parte de soporte sólido del rebajo.
Calculando el valor "k"
El valor "k" se puede calcular leyendo el BioCell lleno a 977 y 900 nm, y restando la absorbancia de referencia de 900 nm de la absorbancia de 977 nm. Si el valor "k" determinado se desvía del valor predeterminado de 0,180 (dado en el software de análisis de datos Agilent BioTek KC4 y KCjunior), entonces introduce el nuevo valor en el momento de la lectura.
Figura 2. BioCell de Agilent BioTek con orientación aproximada para llenado. El orificio de llenado está inclinado hacia arriba para que el BioCell pueda llenarse completamente.
Utilizando el BioCell
Para obtener mediciones precisas de absorbancia, el BioCell debe colocarse en uno de los pozos de la placa del adaptador del BioCell (Figura 3). Asegúrate de orientar el BioCell para que la región de transmisión quede ubicada sobre el orificio a través de la parte inferior del adaptador. Los pozos del adaptador están posicionados para que la región de transmisión del BioCell quede ubicada en ubicaciones específicas de la placa de 96 pozos. El adaptador es capaz de soportar hasta ocho BioCells simultáneamente.
Figura 3. Adaptador BioCell de Agilent BioTek con ocho BioCells. Los BioCells se colocan en pozos correspondientes a ubicaciones específicas en una microplaca de 96 pozos, y el adaptador se coloca en un soporte del lector de microplacas. El lector puede realizar todas las funciones con el BioCell que puede realizar con muestras de microplacas.
Usos alternativos del BioCell
El BioCell también se puede usar para otros fines además de la corrección de longitud de trayectoria. Como la celda permite la fotometría vertical con una longitud de trayectoria fija de 1 cm, se puede utilizar para escaneos espectrales o determinaciones de absorbancia de muestras. Estos resultados se pueden comparar directamente con los valores obtenidos usando un espectrofotómetro convencional y cubetas, ya que las longitudes de trayectoria de la luz son equivalentes.
Vaciado y limpieza del BioCell
Para vaciar el BioCell, retira el fluido utilizando un pipeteador de canal único (punta de 200 µL) o una pipeta Pasteur estrecha. El BioCell está hecho de cuarzo óptico y es resistente a la mayoría de los elementos químicos, excepto aquellos que contienen ácido fluorhídrico. Se recomienda limpiar el BioCell enjuagándolo varias veces con agua desionizada o destilada. Para acelerar el secado, enjuaga el BioCell con etanol o metanol al 95% después del último enjuague con agua.
Adaptador para el BioCell
Para utilizar el recipiente (cubeta) BioCell es necesario adquirir el adaptador con referencia 7270512.
Compatibilidad
Compatible con todos los lectores y espectrofotómetros de microplacas de Agilent Biotek.
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